尊龙凯时提供的本试剂盒专为科学研究设计,禁止用于医学诊断。以下是人黏膜素细胞黏附分子(MAdCAM-1)ELISA试剂盒的使用说明。
检测原理
本试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)进行检测。其操作流程为:首先将标本、标准品及HRP标记的检测抗体逐次加入预先涂布了adropin(AD)抗体的微孔中,经过适当的温育后进行彻底洗涤。随后,加入底物TMB,TMB在过氧化物酶的催化下呈现蓝色,并在酸性环境下变为最终的黄色。颜色的深浅与样品中adropin(AD)的浓度成正相关。使用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),计算样品浓度。
样品收集、处理及保存方法
- 血清:使用不含热原和内毒素的试管,操作过程中避免任何细胞刺激,采集血液后以3000转离心10分钟,迅速小心地分离出血清和红细胞。
- 血浆:采用EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝,3000转离心30分钟后取上清。
- 细胞上清液:以3000转离心10分钟去除颗粒和聚合物。
- 组织匀浆:将组织与适量生理盐水捣碎,3000转离心10分钟后取上清。
- 保存:如果样本未及时检测,请按一次用量分装并冻存于-20℃,以避免反复冻融,解冻时请在室温下确保样品均匀充分解冻。
操作注意事项
该试剂盒成分包括标准品(S0-S5),其浓度依次为:0、25、50、100、200、400pg/mL。试剂准备时,请按照以下步骤稀释20×洗涤缓冲液:用蒸馏水按1:20比例稀释,即将1份20×洗涤缓冲液与19份蒸馏水混合。
结果判断
绘制标准曲线:在Excel工作表中以标准品浓度为横坐标,对应OD值为纵坐标,绘制线性回归曲线,利用曲线方程计算各样本浓度值。
尊龙凯时提醒用户遵循上述操作说明,以确保实验结果的可靠性与准确性。对于任何试剂盒性能的相关问题,请仔细查阅说明书。